جدا سازی RNA از جفت انسان

RNA ازبافت جفت انسان با دو روش تخلیص شده است.در هر دو روش بافت

درحضورنمک واسرشتی قوی (گوانیدن تیوسیانید) وکل RNAشامل RNA

هسته وسیتوپلاسم ازسایر مولکوهای سلولی جدا شد. در روش اول RNAبرحسب

چگالی بالای مولکول بر روی شیب نمک کلرید سزیم پس از سانترفوژکردن در

سرعت بالا تخلیص شد، ودر روش دوم جدا سازی RNAازسایر مولکولها با

استفاده ازفنل در یک مرحله و غلظت بالای نمک کلرید لیتیم در مرحله ی دیگر

که موجب حل شدن DNAمیگردد،انجام گرفت.هر دو روش چند بار تکرارشد

و حدود500-300میکروگرم RNA از هر گرم بافت به دست آمد.RNA ها

روی ژلهای آگاروز در حضور فرم آلدئید الکترو فورزشدند.نوارهایs28وs18

RNA ریبوزومی پس از رنگ آمیزی به وضوح مشاهده شدند واندازه ی سایر

RNAها بین500 و5000 نوکلئوتید بودند.که این داده ها سلامتیRNA های

استخراج شده را نشان می دهد.

RNA به دست آمده که عمدتا RNA ریبوزومی است.دو بار بر روی ستون

سلولزمتصل بهoligo-dT برده شد.RNA ریبوزومی در غلظت بالای نمک

و بخشRNA پیک دارای دم poly A در غلظت پایین نمک از ستون خارج

شدند. در کوروماتوگرافی اول،ابتدا95٪ ازRNA در نمک بالا وسپس 2/7

درصدRNAِ در نمک پایین از ستون خارج شد.

این نسبت توزیع RNA با گزارشهای قبلی به خوبی تطبیق میکند.

در کوروماتوگرافی دوم،RNA poly A+ مجددا روی ستون برده شد.

و75درصدآن در نمک بالا و9/1 درصد در نمک پایین بدست آمد.مقدار

RNA poly A+ آمده در این کوروماتوگرافی حدودا پنج برابرکمتراز

مقدارموردانتظاربود ، که مسئله مورد بررسی است.

جداسازیRNA poly A+ با استفاده از سلولز متصل به oligo-dT در

ظرف( بجای ستون) نیز انجام گرفت، ولی نتایج حاصل مطلوب نبوده اند،

به خصوص که مقدار مصرف سلولزمتصل بهoligo-dT که بسیار گران-

قیمت است در این روش زیاد می باشد.

ارائه شده توسط:

دکترالهه الهی

گروه زیست شناسی دانشکده علوم دانشگاه تهران

قورباغه ای با دل شیر

در ساحل رودخانه ((ریو)) در غرب کلمبیا قورباغه درشت و طلایی رنگی با نام علمی ((phyllobates terribillis
زندگی می کند. این قورباغه از لحاظ بی باکی بیشتر به شیر شباهت دارد تا به قورباغه! شما به راحتی می توانید به این جانور کم تحرک نزدیک شوید و چشم هایش را دوخته در چشم های خود ببینید. گاهی بر پشت این جانور خراش هایی مشاهده می شود. این خراش ها توسط بومی هایی ایجاد شده است که نوک نیزه خود را بر پشت این جانور می مالند.
همین مالش سم کافی را برای کشتن یک پرنده حتی یک میمون را فراهم می سازد. با چنین اسلحه مرگباری این قورباغه (با خودم گفتم معلومه با چنین سمی!) هراسی از جانوران شکارچی ندارد. دانشمندان آلکالویید سمی این قورباغه را استخراج کردند و آن را ((با تراکو توکسین)) نامیدند . آن ها معتقدند که این قورباغه ها آلکالویید سمی خود را از طریق غذا و در واقع مورچه ها و کرم ها و پروانه های بخت بر گشته!!! به دست می آورند.
محمدامین میری
Refrence:new sientistdecember 1999/vol. 49/no.12

دو ترجمه جدید

1-روشی برای تعریف کلمه هاى ژنتیکی

دانشمندان تا کنون موفق به یافتن بیش از30هزار کلمه در ژنوم انسان شده اند.

که زبان بدن ما را تشکیل میدهند. اما هر یک از این کلمات چه معنایی دارد؟

دکتر کیم از دانشگاه استنفورد اولین دایرة المعارف را برای این کلمات تعریف

کرده است که می تواند که میتواند به دانشمندان دیگر در فهم عملکرد ژنهایی که

به تازگی کشف میشوند،کمک نمایند. وی به همراه یکی از دانشجویانش از فعالیت

های ژنهای شناخته شده در چهار موجود زنده انسان،مگس سرکه،کرم گرد(C.elegans)

ومخمردر تشکیل دایره المعارف ژنتیکی استفاده نموده وتوانستند گروههای ژنی مختلف

را با عمل مشابه در این دایرة المعارف مشخص نمایند. به این ترتیب محققان می توانند

عمل هر ژن ناشناخته رابراساس عمل شناخته شده ژنهایی که همزمان باآن در یک فرآیند

شرکت میکنند، تعیین نمایند.

به عنوان مثال 5 ژن ناشناخته که در گروه ژنهای شرکت کننده درتقسیم سلولی قرار

می گیرند. احتمالا در فعالیت سلولهای سرطانی نقش دارند.

نتایج این تحقیق بویژه در تشخیص عمل ژنهای شرکت کننده دربیماری های مختلف

و یا نقش های ژن های موتانت بسیار مفید خواهد بود.

Stanford univercity medical cancer_2003 : Refrence

2-مولکول تنظیم کنندهای برای حیات سلولی وبیماری کشف شد

دانشمندان بخش فارماکولوژی سلولی ومولکولیUCSFبرای اولین بار راهی پیدا کردند.

که بتوان تغیرات در فسفوریلاسیون پرتئین های سلولی را مشخص کرد.

فسفات ها به پرتئبن های درون سلولها متصل می شوند و آنها را به فرستادن علائمی هدایت

می کنند. که با درک این علائم، موجود زنده قادر خواهد بود به تغییرات سریع محیطی سازگار

شود دیابت،Hypertansion و بسیاری از سرطان ها زمانی بروز می کنند که این مولکولهای

ساده وجود نداشته یا به غلط متصل شوند. با توجه به این که فوسفوریلاسیون که بسیاری از

فرآیندهای بیولوژیکی را کنترل می کند و شناخت محل صحیح اتصال مولکولهای فسفات به

پرتئین هایی که آنها را حمل می کنند این روش تعیین میزان تغیرات فوسفوریلاسیون میتواند

دراینده راههای درمانی جدیدی می تواند به با زارعرضه شود که نوع خاصی ازپرتئبن کیناز

رابهطور معمول حمل کننده مولکولهای فسفات است . به ان محلهای خاص هدایت نموده واز

ادامه بیماری جلوطیری نمایند.

Refrence:National Instiutes ofHealth2004
..................................................................................................
عکس روز

ترکیبات کروماتین به عنوان هدف اصلی برای داروهای ضد تومور

..................................................................................................
 در سلولهای یوکاریوت ماده ژنتیکی در اتصال بایک سری پرتئین های  اختصاصی است.

که مجموعا (اصطلاحا)کروماتین نامیده میشوند.پرتئین های سازنده کروماتین دو دسته اند:

1- هیستونها یا پرتئین های بسیار قلیایی

2-هسته سلول و پرتئین های غیر هیستونی

از اتصال هیستون ها بهDNA واحد های تکرار شونده ای به نام نوکلئوزوم حاصل میشود.

که شامل 200جفت باز DNA، ا کتامری از چهار هیستون H1& H3, H4, H2A, H2B

می باشد.

داروهای ضد تومر(Anti tumoor drugs) با هدف گیری نقاط مناسب از اجزا و ترکیبات سلول

،فرآیندهای متابولیکی خصوصا نسخه برداری و همانند سازی را تحت تاثیر قرار داده وسلول را بدین

وسیله به طرف مرگ سوق میدهد.

از بین دارو های ضد تومور،آنتراسیکلین ها(Anthracy clines) جایگاه خاصی دارند.

دانو مایسین و آدریامایسین از موثر ترین و معروفترین آنتی بیوتیکهای آنتراسیکلین می باشد.

که در درمان طیف وسیعی از سرطانها استفاده میشوند.مطابق گزارشات اولیه،

هدف اصلی این داروها در هسته سلول،DNA مولکولی است. از آنجا که در سلولهای یوکاریوتی

DNA برهنه نبوده ودر اتصال با پرتئین است، بررسی اثر داروهای آنتراسیکلین بر روی کمپلکس

DNA-پرتئین یا نوکلئوزوم ها می تواند اطلاعات مفیدی در رابطه با عملکرد و مکانیسم عمل این دارو ها

درسطح کروماتین به دست دهد.در این مطالعه تاثیر آدریامایسین و دانومایسین بر روی کروماتین و

ترکیبات آن مورد بررسی قرار گرفت.

نتایج حاصل از مطالعات اسپکترسکوپی، ژل الکتروفورز وذوب حرارتی نشان می دهد که اثر داروها

وابسته به غلظت بوده و در غلظت های بسیار کم مو جب افزایش جزئی در260تا480نانومتر کروماتین

و در غلظتهای بالا کاهش جذب را موجب میشود. بررسی طرحهای ژل الکترو فورزDNA و پرتئین

به وضوح محو شدن بند های DNA وپرتئین را با بالا رفتن غلظت دارو نشان می دهد.

اتصال هر دو دارو به کرو ماتین موجب افزایش ذوب حرارتی(Tm)DNA شده که موئید فشرده شدن

کروماتین در میان کنش با دارو است. از طرفی میانکنش دارو ها با DNA قبل و بعد از هیستون ها

نشان می دهد که داروهای آنتراسیکلین محل اتصال هیستونها را تا حدودی پوشانده و توانایی هیستونها

را در اتصال به DNA کاهش می دهند.

در مجموع می توان چنین نتیجه گرفت که در سلول نه تنهاDNA بلکه پرتئین های کروماتین نقش مهمی

را در اتصال داروهای آنتراسیکلین به کروماتین به عهده دارند.

به نظر می رسد این دارو ها با ایجاد بند و بست های Crooss-link بین DNA و پرتئین یا پرتئین وپرتئین

موجب فشرده شدن کروماتین شده و بدین ترتیب عملکرد و فعالیت کروماتین از نظر نسخه برداری و

همانند سازی را متوقف می کند

ارائه شده توسط:

دکتر عذرا ربانی، مهوش جعفری ، مرضیه حاج شریفان تقوی

مرکز تحقیقات بیوشیمی بیوفیزیک دانشگاه تهران

برای دریافت کامل مطا لب بالا با ما تماس بگیرید