از آنجائیکه اندازه گیری میزان HbA2 در تشخیص بیماران ژنتیکی بتا تالاسمی حائز اهمیت می باشد بدین جهت برای اولین بار در ایران اقدام به اندازه گیری HbA2 به روش HPLC بر روی 50 فرد مبتلا به بتا لاسمی مینور نودیم . اندازه گیری مقدار بالای HbA2 بطور وسیعی به تشخیص ناقلین بتا تالاسمی مینور کمک می کند ، روش HPLC امروزه به دلیل حساسیت در دقت و سرعت آنالیز جهت اندازه گیری HbA2 وتشخیص دیگر هموگلوبینو پاتی ها کاربرد زیادی پیدا کرده است .
روش اجرا :
ابتدا از نمونه خون تمام افراد که حاوی ضد انعقاد EDTA بود همولیزات تهیه و پس از رقیق نمودن آن را از ستون تعویض کاتیوتی ضعیف weakly cation exhange موسوم به Poly CATA عبور داده و توسط بافر با قدرت یونی متفاوت بطریق گرادیانت کروماتوگرافی انجام گردید . جذب نوری در طول درجه 405 nm توسط detctor تعیین شده واز نسبت مساحت HbA0 به HbA2 محاسبه میزان HbA2 ( % ) اندازه گیری گردید که زمان جداسازی HbA2 کمتر از 10 دقیقه می باشد . در این مطالعه 50 فرد مبتلا به بتا تالاسمی مینور همراه با 50 نفر گروه کنترل ( افراد سالم بدون کم خونی ) مورد بررسی قرار گرفتند که نتایج آن در قسمت نتیجه بررسی شده است .
نتایج :
متوسط CV در طول آزمایش ( within assay ) 1.6% و ربین آزمایش ( Between assay ) 4.9 % می باشد دقت روش با 2 غلظت HbA2 : 1.4 و : 45% HbA2 بررسی گردید که CV در طول آزمایش within assay برای غلظت اول 0.92 و غلظت دوم CV : 1.6 % می باشد ضمنا در مقایسه با روش کروماتوگرافی میکروالکتروفورز بر روی استات سلولز یک ارتباط خطی r = 0.985 به وجود می آید .
هدف از این تحقیق برپایی یک روش عملی سریع ، حساس ودقیق برای اندازه گیری HbA2 توسط روش HPLC به وسیله ستون تعویض کایتول ضعیف می باشد که در این سیستم جداسازی HbA2 که یک مارکر تشخیصی جهت بیماری بتا تالاسمی مینور می باشد در کمتر از 10 دقیقه انجام می گردد ، ضمنا نتایج حاصل از انجام HbA2 به روش کروماتوگرافی میکرو HPLC سرعت و تکرار پذیری در سیستم HPLC به مراتب لاتر می باشد واز این روش می توان بعنوان یک روش سریع ، حساس و عملی در تعیین میزان HbA2 استفاده نمود . در کنار آن با تغییر گرادیانت بافر نیز جداسازی دیگر هموگلوبین ما نیر HbE, HbD, HbC, HbS, HbF, HbA1C و سایر هموگلوبینها میسر می باشد .
سلام:
چه طراحی جالب و محشری ! واقعا عالی بود افرین به این ذوق و سلیقه
از اینکه در مورد تالاسمی مطلب نوشتید متشکرم ولی میبا یست توضیحات جزیی در موردش می دادید البته اگر کار شما را تخصصی کنیم قابل چشم پوشی است در هر صورت خسته نباشید